Брзи тест на аденовирус-излучивање из носа

Намена:

Комплет за тестирање нуклеинске киселине САРС-ЦоВ-2 примењује се за квалитативну детекцију нуклеинске киселине ЦОВИД-19 у брисевима назофаринкса, орофарингеалних брисева и спутума. Резултати теста пружају основу за молекуларну дијагнозу за инфекцију или сумњиве пацијенте и не би требало да се користе као једини критеријум за клиничку дијагнозу.

Материјали:

Процедура тестирања:

А. Припрема узорка

Екстрахована РНК је почетни материјал за САРС-ЦоВ-2 комплет за тестирање нуклеинске киселине.

Важно: Сваки поступак екстракције нуклеинске киселине мора се изводити истовремено са једном позитивном контролом (40 μЛ, разблажити стерилним сланим растворима/ПБС до жељене запремине) и једном негативном контролом (40 μЛ, разблажити стерилним сланим растворима/ПБС до жељене запремине).

Препоручује се коришћење следећих комерцијалних комплета за екстракцију нуклеинске киселине: ПуреЛинкТМ Мини Кит за вирусну РНК/ДНК (Инвитроген); Мини кит вирусне РНК (КИАГЕН); ТИАНамп Хи-ДНА/РНА комплет (ТИАНГЕН);

Б. Постављање реакционе мешавине

1. Све реагенсе и узорке треба потпуно одмрзнути, потпуно измешати и кратко центрифугирати на собној температури (приближни опсег од 18 до 25 степени) пре употребе.

2. Припремите потребну запремину реакционе мешавине у полипропиленској микроцентрифугалној цеви одговарајуће величине.

3. Одпипетирајте 25 µЛ реакционе мешавине у сваки потребан бунар одговарајуће оптичке 96-реакционе плоче или одговарајуће оптичке реакционе цеви.

Ц. Додавање шаблона

1. Додајте 5 μЛ екстраховане РНК из узорака/позитивне контроле/негативне контроле. Укупна запремина је 30 μЛ.

2. Темељно измешати узорке и контроле са Реацтион Миком пипетирањем горе-доле/Вортексом.

3. Затворите реакциону плочу 96-реакционе плоче одговарајућим поклопцима или оптичким лепљивим филмом и реакционе епрувете одговарајућим поклопцима.

4. Центрифугирајте реакциону плочу 96-бунарића у центрифуги са ротором микротитарске плоче 30 секунди на приближно 2500 обртаја у минути.

Д. Програмирање ПЦР инструмента у реалном времену

За основне информације у вези са подешавањем и програмирањем различитих ПЦР инструмената у реалном времену, погледајте упутство за употребу одговарајућег инструмента. Тест је оптимизован за АБИ7500 ПЦР систем у реалном времену. ПЦР тест се изводи у условима циклуса као што је описано у табели испод.

Дефинишите детекторе флуоресценције

*Подесите интерну референцу флуоресценције инструмента на „Ноне“, на пример: За инструменте серије АБИ подесите „Пассиве Референце“ на „Ноне“.

Е. Анализа података

Подесите параметре анализе и анализирајте податке у складу са упутствима за употребу релевантних инструмената.

Узмимо АБИ 7500 као пример:

Основна линија треба да буде подешена на опсег који елиминише позадинску флуоресценцију пронађену у раним циклусима појачања, али која не преклапа област у којој се сигнали појачања уздижу изнад позадине (почетна вредност: 3~10; крајња вредност: {{2} }). Праг циклуса (Цт) треба да буде у основи експоненцијалне фазе. Кликните на „Анализа“ да бисте аутоматски добили резултат анализе и прочитајте резултат детекције у прозору „Извештај“.

Popularne oznake: аденовирус брзи тест-назални секрет, Кина, добављачи, произвођачи, фабрика, расути